基因过表达遇到多个转录本了吧?快来看看怎么选择!

类别: 新闻资讯 日期: 2022-09-22 作者: Editor

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

基因转录本的选择

        很多小伙伴在第一步找目的基因信息的时候,经常会发现自己研究的基因居然有很多长短不一的转录本(transcript variant),以人的FMR1基因为例,如下图:

   关于这个问题之前已经遇到无数小伙伴咨询了,大家都不知道转录本应该如何来选择,所以在这里分享几条经验,期望能对大家有所帮助。

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人源基因的转录本选择

人源基因的转录本选择:

可以参考NCBI上新发布的MANE project(是特定有临床代表意义的转录本,一般人源基因会有这项标注)推荐转录本,这个可以作为基因功能研究的首选转录本。

NCBI上搜索目的基因以人的FMR1基因为例,选择NM_002024这个转录本,如图:

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其他物种基因的转录本选择

对于小鼠或者大鼠亦或是其他物种基因没有1中的标注,可参考如下方案:

A. 过表达一般优先选择最长的来进行,可首选ORF转录本最长的那个。

B. 选转录本1号(variant 1),大部分情况人源基因转录本1同时具备以上说明的所有属性,既是NCBI MANE project推荐转录本,也是ORF最长的转录本。

C. 如果已经确认在某种细胞上做实验(如Hela细胞),直接设计可以扩增多个转录本的全长引物,做PCR来测序,测序出来的结果就是该细胞株中表达的转录本,这样选择虽然有点麻烦,但是信息会很准确。

D.咨询一下大的ORF克隆供应公司(如GeneCopoeia,OriGene等)或者直接在他们官网查询现货数据,查下他们那个转录本是现货的或者现货质粒种类最多的,说明已经用过的人很多,相信也就不难选择了。

 

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