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质粒是一类在真核细胞核外或原核细胞拟核区外，能够进行自主复制的遗传单元，通常为DNA分子，有共价封闭的环状结构，基因工程中质粒常用做基因的载体（Vector），分子量通常在1.5-20 kb之间
质粒特点
能独立于寄主染色体，有可自主复制的能力，并能够将核酸信息稳定地传递给后代细胞
质粒的基础核心元件
01
复制起始位点
质粒中的一段特定富含AT序列与重复序列，细胞中起始质粒独立复制，决定载体宿主类型及质粒的复制拷贝数，如ori
02
筛选标记
用于摇菌扩增的抗性基因，常见为Amp，Kan；真核载体一般还会有稳定筛选的抗性基因，常见为Neo，puro，BSD等
03
多克隆位点(MCS)
多个酶切位点组成，用于酶切连接插入外源DNA片段
04
其他元件
表达元件，调控元件，蛋白标签
质粒的分类
克隆载体
可带动外源基因在宿主细胞中复制扩增，它用来克隆和扩增DNA片段（基因）的载体
表达载体
除了有克隆载体的基本元件，还有转录/翻译所必须得DNA序列的载体
蛋白标签
蛋白标签图示
方便检测
通常是高亲水的6-10个氨基酸的小肽段，如His，Flag，HA，myc标签
方便观察
通常为荧光标签蛋白，如GFP，mcherry标签
方便纯化与富集
用于对应亲和纯化或IP实验，如His，GST，Flag，HA，GFP标签
原核表达提高表达量与促进可溶性
避免表达量低或者形成包涵体，如sumo，MBP，GST等
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